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DETERMINACIÓN RADIOMÉTRICA DE HELICOBACTER PYLORI EN SALIVA C.Goldman, P. Oliveri, M. Almuzara, C.
Barberis, J. Boccio, O. Degrossi, M. Alak, G.
Calmanovici, M Buzurro, J. Adami, R- Caro, M.
Zubillaga.
Laboratorio de Radioisótopos y Departamento de
Bioquímica Clínica. Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA. Sanatorio Modelo Quilmes,
Buenos Aires. Instituto Argentino de Diagnostico y Tratamiento, Buenos Aires.
cgol@huemul.ffyb.uba.ar
Introducción: La cavidad oral
juega un rol preponderante en la transmisión de la infección por Helicobacter pylori.
Siendo la saliva el probable vector involucrado en esta vía, hemos desarrollando un
método de análisis radiométrico para su evaluación
Objetivos: Con el fin de poner a
punto éste método, se fijaron varios objetivos:
1) determinar la cinética de hidrólisis de
14C-Urea por Hp y otras bacterias comensales de la cavidad oral,
2) determinar los valores de tasa de hidrólisis
de 14C-Urea para distintas concentraciones de Hp y otras bacterias,
3) hallar los tiempos de corte para este método,
4) evaluar la presencia de Hp en saliva de 61
pacientes.
Métodos: La cinética de
producción de 14CO2 fue evaluada mediante el agregado de 2 µCi de 14C-Urea a
concentraciones entre 10 y 15 10*8 UFC/ml de diferentes bacterias. El 14CO2 liberado fue
colectado a los 5,10,15,20,25,30 y 60 minutos, y a las 3,6 y 24 horas. Las muestras fueron
medidas en un contador de centelleo liquido. El porcentaje de 14CO2 colectado (% de 14CO2)
fue calculado como: %14CO2=[dpm muestra/ dpm standard]:xlOO. Se graficó el porcentaje de
14CO2 colectado en función de la concentración para cada bacteria y para cada tiempo,
para establecer los valores de cut off del método. Se evaluaron muestras de saliva de 61
pacientes obtenidas mediante salivación en colector estéril. Se adicionaron 2.5 µCi de
14C-Urea. El 14CO2 liberado fue colectado a los 5, 15 y 60 minutos y a las 24 horas. Las
muestras fueron medidas y el % de 14CO2 fue calculado de la forma descripta previamente, y
los resultados fueron comparados con el %14CO2 producido por concentraciones conocidas de
Hp.
Resultados: La cinética de
hidrólisis de 14C-Urea del Hp difiere estadísticamente de la del resto de las bacterias.
Puede observarse una clara diferencia al evaluar las tasas de producción de 14CO2 para
cada tiempo y cada concentración bacteriana entre Hp y las demás bacterias. El 14CO2
acumulado a los 5, 15 y 60 minutos para Hp es estadísticamente mayor que para las otras
bacterias estudiadas. De los 31 pacientes con infección gástrica, 26 (83.87%)
presentaron valores elevados de tasa de 14CO2 en saliva, mientras que de los 30 pacientes
sin infección gástrica, 16 (53.33%) lo hicieron. Los restantes pacientes presentaron
valores no detestables en saliva (menores a 10 UFC de Hp/ ml).
Conclusiones: Es posible
diferenciar Hp de otras bacterias que pueden colonizar la cavidad oral, mediante su
cinética de hidrólisis de la urea. Los valores de 14CO2 producidos por Hp a los 5, 15 y
60 minutos permiten diferenciarlo del resto de las bacterias. Por medio de este método es
posible determinar el grado de colonización de la cavidad oral por Hp, siendo, de gran
importancia para evaluar la erradicación de la infección. |